Post by jone447 on Aug 2, 2023 1:02:51 GMT -5
viP-CLIP 来表征小鼠 RBP 的 mRNA 靶标 组织中 RNA 和蛋白质交联效率低是由于短波长 (254 nm) 紫外线的穿透深度有限，将 RBP-RNA 交联主要限制在单细胞层或组织表面。为了克服这一限制并确定不同感兴趣组织（即肝、脑、睾丸、热、肾、脾）中的 RBP-RNA 相互作用，我们研究了在小鼠腹腔（ip）注射 4SU 是否能够
充分掺入 RNA 中以增强交联（图 1a ）。我们首先建立了一种通亚洲手机号码列表过 HPLC 4SU 的方法（补充图 1a、b））。药代动力学研究表明，4SU 在血清中于 30 分钟达到峰值，单次注射后约 2 小时（780 mg/kg 体重）在血液中仍可检测到（补充图 1c ）。此外，在体温（37°C）下，随着时间的推移，4SU 在血清中保持稳定（补充图 1d）。然后，我们通过在 15 小时内每 2.5 小时一次腹腔注射小鼠来评估 4SU 的吸收和
掺入组织，这一时期涵盖了大多数 mRNA 的生命周期37。4SU 和对照 PBS 注射小鼠的血清 ALT、LDH 和 AST 水平相似，表明以这些剂量和持续时间施用 4SU 没有肝毒性（补充图 1e-g ））。最后一次注射后2.5小时，收获器官，快速冷冻并在液氮下研磨成细粉。随后，在液氮连续冷却下 将粉末以0.3J/cm 2的剂量暴露于365nm的紫外光下4次（图1a）。我们还应
充分掺入 RNA 中以增强交联（图 1a ）。我们首先建立了一种通亚洲手机号码列表过 HPLC 4SU 的方法（补充图 1a、b））。药代动力学研究表明，4SU 在血清中于 30 分钟达到峰值，单次注射后约 2 小时（780 mg/kg 体重）在血液中仍可检测到（补充图 1c ）。此外，在体温（37°C）下，随着时间的推移，4SU 在血清中保持稳定（补充图 1d）。然后，我们通过在 15 小时内每 2.5 小时一次腹腔注射小鼠来评估 4SU 的吸收和
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